AB5500+珂睿双鱼-Ⅰ二维液相测定α-鹅膏毒肽（α-amanitin）

蘑菇中毒是影响公众健康突出的公共卫生问题之一。 在我国，含鹅膏毒肽蘑菇中毒死亡人数超过蘑菇中毒总死亡人数的90% 。含鹅膏毒肽蘑菇中毒是指因食用含有鹅膏毒肽的蘑菇所引起的以急性肝损伤为主要特征的一种疾病。该疾病进展快，病情复杂，病死率高。鹅膏毒肽为双环八肽结构，相对分子质量973000 990000。根据侧链取代基团的不同分为α-鹅膏毒肽（α-amanitin）、 β- 鹅膏毒肽（β-amanitin）、 γ-鹅膏毒肽（γ-amanitin）、ε-鹅膏毒肽（ε-amanitin）、鹅膏酸（amanin）、鹅膏酰胺（amaninamide）、鹅膏蕈（amanullin）、鹅膏蕈酸 （amanullinic acid）和普罗马琳（proamanullin）等，研究较为集中的为α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽和γ-鹅膏毒肽。鹅膏毒肽化学性质稳定，易溶于水、甲醇、乙醇、 液氨、吡啶等，耐高温、低温、日晒，进食后不被胃酸和 酶降解，含鹅膏毒肽的蘑菇经冷冻、干制、以及煎炒煮炖 等加工都不能消除其毒性。

本文以α-鹅膏毒肽（α-amanitin）为研究对象，基于AB5500，建立二维液相-三重四级杆质谱检测方法，方法操作简单，具有较高的准确性、灵敏度和可靠性。

测试仪器：

三重四级杆质谱仪：AB5500

二维液相色谱仪：珂睿双鱼-Ⅰ（Pisces-Ⅰ）

测试方法：

1、质谱方法

1.1离子源参数

离子源类型：Turbo Spray ESI+

离子源高压IS:  5500.00V

离子源温度TEM:  550.00℃

反吹气CUR:  30.00

雾化气GS1:  60.00

加热气GS2:  60.00

1.2 MRM化合物表

2、液相参考条件

固相萃取柱：珂睿HLB-0321200 2.1*30mm；一维色谱柱，在线富集作用。

色谱柱：珂睿CPPH-102125 2.1*100mm；二维色谱柱，分离作用。

流动相A：0.1%甲酸-5mM乙酸铵-水

流动相B：乙腈

柱温：40℃

进样量：1000μL

梯度表：

泵1

泵2

阀切换时间表：

3、二维液相原理图

AB5500+珂睿双鱼-Ⅰ系统

4、实验结果

0.5ug/L α-鹅膏毒肽（α-amanitin）TIC及XIC图

α-鹅膏毒肽（α-amanitin）在0.1-10ug/L内呈现良好线性，相关系数0.999

5、结论

本文基于AB5500+珂睿双鱼-Ⅰ系统建立α-鹅膏毒肽（α-amanitin）的二维LC-MS/MS分析方法。该方法分析速度快，灵敏度高，该系统适用于蘑菇类食品风险筛查和食品安全事故的验证等不同需求的分析检测需求。

 文章来源 | 谱标实验室

撰写 | 高代升

编辑排版 | 李秋

审核 | 邓武剑

复审 | 张俊晓

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