26年3月31日,SCIEX 6500+/4500+岛津30A,在珠海搭配干血斑萃取,ACMP进样系统血液维生素,左旋肉碱,牛磺酸等检测方案

合作伙伴：珠海大型保健品&医药研发公司

仪器类型：液质联用系统

品牌：安捷伦

型号：AB SCIEX 6500+/4500+岛津30A

2026年3月31日，3月完好收官，两套仪器完成交付！

珠海大型保健品&医药研发公司项目圆满交付！

AB SCIEX 6500+/4500+岛津30A全套系统，搭配干血斑萃取、ACMP进样系统血液维生素、dan碱、左旋肉碱、牛磺酸等检测方案

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两套液质联用系统（SCIEX 6500+ 或 4500+ 搭配岛津 30A 液相）以及干血斑（DBS）前处理需求，针对维生素、dan碱、左旋肉碱、牛磺酸等极性小分子的检测，我为你设计了以下全套解决方案。

这套方案的核心难点在于干血斑基质的复杂性以及目标物（特别是牛磺酸和肉碱）的高极性，因此方案重点在于前处理的自动化萃取和液相条件的优化。

🧪 一、 硬件配置与系统适用性分析

两套系统均能满足检测需求，但在灵敏度和通量上略有差异：

岛津 30A 液相的作用： 提供高压、低脉冲的流速，确保色谱峰形尖锐，特别是对于极性化合物在色谱柱上的保留至关重要。

💧 二、 干血斑 (DBS) 自动化萃取方案

干血斑样本量小且基质效应强，手工萃取误差大。结合参考信息中的自动化理念（如CLAM或ATLAS-LEXT的工作流），建议采用以下自动化或半自动化萃取流程，以提高回收率和重现性：

1. 前处理流程（建议配合自动化液体工作站）

取样： 使用打孔器从干血斑卡片上打下直径 3mm-6mm 的圆片，置于96孔板或深孔板中。

添加内标： 加入含有同位素内标（如 d9-dan碱, d3-肉碱）的萃取溶剂。

注意： 对于维生素（特别是脂溶性）和极性小分子，通常使用甲醇:乙腈:水的混合体系，或者含有0.1%甲酸/乙酸铵的甲醇溶液进行萃取。

振荡萃取： 剧烈振荡 30-45 分钟（室温或4℃）。

离心/过滤： 离心后取上清液。如果是自动化系统（如CLAM-2040），可直接在线进行蛋白沉淀和过滤。

进样： 将上清液转移至进样瓶或直接由自动进样器吸取。

🔬 三、 液相色谱 (LC) 分离策略

挑战： dan碱、左旋肉碱、牛磺酸属于强极性化合物，在普通C18柱上几乎不保留，容易受基质干扰。

方案 A：HILIC 模式（亲水相互作用色谱）—— 推荐

这是检测极性小分子的首方案。

色谱柱： 选用 HILIC 柱（如 Waters BEH Amide, Phenomenex Luna NH2, 或 ZIC-HILIC）。

流动相：

A相：10mM 乙酸铵（或甲酸铵）+ 0.1% 甲酸的水溶液。

B相：10mM 乙酸铵（或甲酸铵）+ 0.1% 甲酸的乙腈溶液（乙腈比例通常 >70%）。

作用： 利用高比例有机相让极性物质在柱头保留，通过梯度洗脱实现牛磺酸、dan碱与基质盐分的分离。

方案 B：离子对色谱法

如果实验室只有C18柱，可添加离子对试剂（如七氟丁酸 HFBA 或 全氟戊酸 PFPA）。

缺点： 离子对试剂容易污染质谱离子源，且平衡时间长，不建议在6500+这种高灵敏度仪器上长期使用，除非必要。

📊 四、 质谱 (MS/MS) 检测条件优化

SCIEX 仪器（6500+/4500）配备的 Turbo V 离子源 非常适合此类分析。

离子源模式：

正离子模式 (+)： 适用于 dan碱、左旋肉碱（季铵盐结构，极易质子化）。

负离子模式 (-)： 适用于 牛磺酸（磺酸基团）和部分维生素（如维生suD，需APCI源或特殊ESI条件）。

策略： 利用 SCIEX 的 Polarity Switching（极性快速切换） 功能，一针进样同时采集正负离子数据，无需分开进样。

关键参数设置 (参考)：

CUR (气帘气)： 30-35 psi (较高气帘气有助于去除DBS基质中的盐分干扰)。

TEM (温度)： 500°C - 600°C (高温有助于去除流动相中的盐，特别是HILIC模式高盐条件下)。

IS (离子电压)： 5500V (+) / -4500V (-)。

MRM 离子对监测示例 (需根据实际调谐)：

📌 五、 方案总结与建议

系统选择： 如果你的样本量非常大且需要同时检测痕量wei生素D和丰度高的肉碱，SCIEX 6500+ 的宽动态范围优势更明显。如果是常规体检项目，SCIEX 4500 性价比更高。

前处理是关键： 干血斑的均一性和萃取效率直接影响结果。强烈建议引入自动化液体处理平台（如参考资料中提到的CLAM或类似移液工作站）来替代手工打孔和浸泡，以减少人为误差。

色谱分离： 必须使用 HILIC 色谱柱。不要试图用普通C18柱去分离牛磺酸和dan碱，否则会出现严重的基质效应和保留时间漂移。

这套组合（SCIEX高敏质谱 + 岛津稳定液相 + HILIC分离 + 自动化DBS萃取）是目前临床质谱实验室检测微量极性代谢物的黄金标准。