2025年12月18日赛默飞U3000液相色谱仪DAD+FLD+RID在佛山精准检测饲料中VitaminA,D,E含量

合作伙伴：佛山某饲料厂

仪器类型：液相色谱仪

品牌：赛默飞

型号：U3000（DAD+FLD+RID）

2025年12月18日，喜讯！谱标科技交付佛山某饲料厂的赛默飞U3000液相色谱仪（配置DAD+FLD+RID），顺利完成全链条服务落地。该设备可高效精准检测饲料中wei生素A、D、E含量，硬核实力与贴心服务双获认可！致谢支持，聚力前行！

赛默飞（Thermo Scientific）UltiMate™ 3000（U3000）高效液相色谱仪是一款模块化、高灵敏度、高稳定性的HPLC系统。当其同时配置二极管阵列检测器（DAD）、荧光检测器（FLD）和示差折光检测器（RID）时，可充分发挥多检测器联用优势，实现对饲料中脂溶性wei生素A、D、E的高效、精准、全覆盖检测。

一、为什么U3000 + DAD/FLD/RID适合饲料中wei生素A/D/E分析？

✅ RID一般不用于这三类维生素检测（因灵敏度低、不能梯度洗脱），但在U3000系统中若用于其他成分（如糖类、甘油），可与其他检测器并联使用。

二、典型分析策略（按维生素分类）

1. wei生素A（Retinol / Retinyl Acetate）

色谱柱：C18 反相柱（如 Acclaim™ 120 C18, 5 μm, 250 × 4.6 mm）

流动相：甲醇/水 或 甲醇/乙腈（等度或梯度）

检测器：DAD

波长：325 nm（主峰），全波长扫描（200–400 nm）用于峰纯度验证

前处理：皂化 → 有机溶剂（正己烷/yi醚）提取 → 氮吹复溶

2. wei生素D₂/D₃

由于其紫外摩尔吸光系数低（λmax ≈ 265 nm，ε 小），直接DAD检测限高（~0.1 μg/mL），推荐采用柱后衍生+FLD方案：

方法A：直接DAD法（适用于高含量预混料）

DAD检测：265 nm

需严格净化（硅胶柱/SPE）去除dan固醇等干扰物

方法B：柱后光化学衍生 + FLD（推荐，符合国标/药典）

原理：wei生素D经紫外光照射生成强荧光吡啶啉衍生物

系统配置：

U3000泵 + 自动进样器 + C18柱

柱后反应器（Photochemical Reactor，如 Aura Industries 光化学衍生器）

FLD检测：Ex ≈ 265 nm，Em ≈ 400–420 nm

灵敏度：可达 0.1–1 ng/mL，满足饲料中痕量检测需求

标准依据：GB/T 17818-2010（饲料中wei生素D₃测定）

3. wei生素E（α/γ-生育酚等）

优选检测器：FLD

Ex: 290–295 nm，Em: 325–330 nm

辅助检测器：DAD（292 nm）用于确认保留时间一致性

优势：FLD对生育酚天然荧光响应高，饲料中油脂、色素等干扰小

前处理：简单提取（乙醇/正己烷）即可，无需皂化（避免氧化）

三、U3000系统优势在本应用中的体现

功能应用价值

四元梯度泵（LPG-3400RS）:精确控制复杂梯度，分离VA、VD、VE及异构体

温控自动进样器（WPS-3000TSL）:避免热不稳定维生素降解（如VA易氧化）

DAD全波长采集:实时光谱比对，识别共流出杂质（如饲料中类胡萝卜素干扰VA）

FLD高灵敏检测 :      满足ppm级饲料添加剂定量要求（如VE常添加50–500 mg/kg）

Chromeleon CDS软件:支持多检测器数据同步采集、合规报告（符合GLP/GMP

四、典型饲料样品前处理流程（简化版）

称样：1–5 g 饲料粉

皂化（仅VA/VE需，VD通常不皂化）：

加抗坏血酸/焦性没食子酸（抗氧化剂）

KOH-乙醇溶液，60–70°C 水浴30 min

提取：正己烷或石油醚，振荡萃取

洗涤：水洗至中性

浓缩：氮吹至近干，甲醇/乙腈复溶

过滤：0.22 μm 有机系滤膜，进样

⚠️ 注意：wei生素D对光、热、氧敏感，全程避光、加抗氧化剂、低温操作！

五、相关标准方法参考

GB/T 17817-2010：饲料中wei生素A的测定（HPLC法）

GB/T 17818-2010：饲料中wei生素D₃的测定（HPLC法，含光化学衍生）

GB/T 17812-2008：饲料中wei生素E的测定（HPLC-FLD法）

AOAC 992.06 / 2001.13：国际通用方法

六、总结

Thermo Scientific UltiMate 3000 HPLC + DAD/FLD 联用系统，通过：

DAD 准确定性wei生素A，

FLD（尤其结合柱后衍生）高敏检测wei生素D和E，

可实现饲料中三大脂溶性维生su的一站式、高通量、合规化检测，全满足饲料企业质量控制、第三方检测及监管抽查的需求。