分析二手高效液相色谱HPLC与二手气相色谱的特点及区别

高效液相色谱法HPLC又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。它在经典色谱理论的基础上，采用了高压泵、化学键合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等新实验技术建立的一种液相色谱分析法。

特点：①高压;②高速;③高效;④高灵敏度;⑤应用范围广;⑥柱子可反复使用;⑦样品量少、容易回收.

气相色谱GC分析是指流动相为气体的色谱分析法。气体和易于挥发的液体或固体 等试佯都可用气相色谱分析进行分离和测定。

特点：①分析速度快;②选择性好;③分离效能高;④灵敏度高;⑤应用范围广。

二手高效液相色谱分析法(HPLC)，它的基本概念及理论基础（如保留值、塔板理论、速率理论、容量因子、分离度等），与二手气相色谱GC是一致的，但又有不同之处：

分析对象的区别

GC：适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品;但对高沸点、挥发性差、 热稳定性差、离子型及高聚物的样品，尤其对大多数生化样品不可检测 占有机物的20%

HPLC：适于溶解后能制成溶液的样品(包括有机介质溶液)，不受样品挥发性和热稳定性的限制，对分子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分子和离子型样品均可检测 用途广泛，占有机物的80%。

进样方式的不同,高效液相色谱HPLC只要将样品制成溶液，而气相色谱GC需加热气化或裂解。

流动相差别的区别

GC：流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用力，只与固定相有相互作用。

HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起正向作用。且流动相种类较多，选择余地广，改变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用，当选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相也可以增大分离选择性。

流动相的不同，在被测组分与流动相之间、流动相与固定相之间都存在着一定的相互作用力.

操作条件差别

GC：加温操作

HPLC：室温;高压(液体粘度大，峰展宽小)

二手高效液相色谱HPLC是在液相中进行，对被测组分的检测，通常采用灵敏的湿法光度检测器，例如，紫外光度检测器、示差折光检测器、荧光光度检测器等；

二手高效液相色谱HPLC的定性和定量分析，与二手气相色谱GC分析相似，在定性分析中，采用保留值定性，或与其他定性能力强的仪器分析法连用；在定量分析中，采用测量峰面积的归一化法、内标法或外标法等，但高效液相色谱在分离复杂组分式样时，有些组分常不能出峰，因此归一化法定量受到限制，而内标法定量则被广泛使用。

此外二手高效液相色谱HPLC还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。二手高效液相色谱LPLC的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。二手高效液相色谱检测器HPLC的灵敏度不及二手气相色谱GC。