Quad 7500 LC-MS/MS三重四级杆液相色谱质谱联用系统应用技术
1 生物基质中多肽/蛋白质制剂的定量分析对于新药研发来说至关重要。作为与传统的配体结合试验并行的分析技术,液质联用技术已经发展成为生物分析实验室中蛋白质定量检测的日常手段。与现今的LBAs技术相比,三重四极杆系统在检测小体积样品中的低浓度分析物方面的能力使其成为主要的分析手段。
结论:基于SCIEX Triple Quad 7500 LC-MS/MS系统-QTRAP Ready开发了高灵敏度的肽段定量检测流程。通过具有E Lens技术的OptiFlow Pro离子源和D Jet离子导向的整
合,在生物基质中特征肽段定量检测时与以往产品相比,灵敏度平均提高了3倍。
2 大鼠血浆中完整赖脯胰岛素超灵敏的定量方法
胰岛素类似物是通过在天然胰岛素结构基础上进行改造,形成等效或增效血糖控制的胰岛素替代物。它们中的膳食胰岛素类似物,如赖脯胰岛素、阿斯巴甜胰岛素、格列嗪胰岛素,与人胰岛素相比更容易吸收、起效更迅速,因此研究此类胰岛素类似物的药代动力学和药效学属性至关重要。
结论
• 建立了基于SCIEX Triple Quad™ 7500 LC-MSMS系统 - QTRAP® Ready检测大鼠血浆中赖脯人胰岛素MRM定量方法,该方法灵敏度高。
• 赖脯人胰岛素在大鼠血浆中的定量下限为0.1 ng/mL,该方法分析重现性、准确度、定量线性良好。
• SCIEX 7500系统有超高的灵敏度,得益于其配有E Lens技术加持的OptiFlow Pro离子源和D Jet离子导向技术。
3 高通量靶向脂质组学方法实现广泛的脂质定量
脂质组学中直接进样的鸟枪法是一种广泛使用的脂质组学分析方法。该方法快速简单,但是会受到明显的离子抑制效应,同时,由于脂质分子众多并伴有大量同分异构体的峰重叠,从而使得精确辨认每一种脂质十分困难。正相和反相液相色谱与质谱联用也被广泛应用于脂质组学研究。液质联用方法可以根据脂类物质理化性质的不同对其进行分离,但是建立一个能够同时检测尽可能多的不同类别的脂质分子的定量方法仍然极具挑战。
结论:提出了一种靶向的脂质组学分析策略,该策略能够在脂质分子水平上对多种不同的脂质进行定量(~1900个分子种类)。该方法可以对不同脂类进行色谱分离,减少同分异构体的干扰,更加快速和特异的进行脂质筛选。靶向脂质列表十分全面,涵盖了大部分脂类。所选取的MRMs离子对覆盖12-26个碳、0-6个双键的脂肪酸、包括奇数侧链的脂类物质。该MRM列表是个性化定制的,可以添加新的脂类、亚类和多种脂质分子。利用血浆基质结合LC-MRM分析进行实验,方法灵活度高,得到的结果可靠稳定。开发的简单工具(sMRM Pro Builder模板)可以将靶向MRM方法的优化过程流程化,从而在进行大量Scheduled MRM离子对扫描时得到高质量的结果。
4 人全血中法医类化合物的高灵敏度检测
保持可靠定量的同时,也可实现低水平检测是任何稳定生物分析工作流程的关键性能指标。在法医实验室,超宽浓度范围下,对复杂生物基质样本中的大量分析物同时进行精准定量的能力是非常有挑战性的,通常需要稀释样品,以使其处于仪器的线性范围内。为了进一步减少样品制备和再分析时间,要求采集到足够多的化合物色谱峰,并且获得宽线性动态范围,以确保全面的分析物覆盖率和可靠的定量性能
结论:使用SCIEX Triple Quad 7500系统检测人全血中49种毒物的优化且灵敏的方法。SCIEX OS软件中的Scheduled MRM Algorithm Pro功能实现了数据采样方法的优化。新硬件OptiFlow Pro离子源、D Jet离子导向技术和E Lens技术提供了对所有目标毒物亚- ng/mL级别灵敏度,有些甚至可以降至pg/mL级别,同时保持测量的线性、精确度和准确性。这种超乎寻常的灵敏度的获得,是在没有任何数据质量的牺牲或妥协的情况下实现的,正如在LLOQ下,观察到的极佳的精确度和准确性所证明的那样。总体而言,SCIEX Triple Quad 7500系统的所有功能结合在一起,使得本研究中所检测的一系列毒物的灵敏度得到了大幅提高。
5 提高靶向宿主细胞蛋白肽段定量分析灵敏度的策略
宿主细胞蛋白(Host cell proteins, HCPs)是与重组生物药制剂生产过程相伴产生的主要杂质种类。其含量与制剂的安全性和有效性密切相关,因此从制剂开发到质量控制整个过程都非常需要对HCPs进行定量测定。在下游生产和质量控制阶段,需要靶向定量的HCPs通常是预先制定好的,它们在最终制剂或之后纯化步骤中痕量存在。这使得对于建立更高灵敏度、更快速分析、更皮实耐用、更具复合分析能力(一针进样定量更多的分析物)的靶向HCP分析方法的需求更加强烈。三重四极杆和QTRAP液质联用系统由于其优异的定量分析能力,是开展这项工作的理想平台。
结论:靶向HCP定量分析流程的建立体现了SCIEX 7500系统的高灵敏度、高分析通量、高耐用性以及高复合分析能力信噪比平均提高4倍具有极其优异的灵敏度,其中2/3的目标蛋白为0.02-1 ppm。其余的为1-4.54 ppm在高确信度(每个蛋白4个检测通道)的情况下,所有48个蛋白质的定量用8min的液质联用分析方法完成
6 促尿钠排泄肽类家族环肽类化合物LC-MRM定量灵敏度的提高环肽类化合物如今已成为重要药物。这与其在血液中的稳定性以及口服给药剂量相关。采用液质联用技术开发对生物样本中环肽类化合物的痕量定量检测仍具有非常大的挑战,生物样本基质中的高背景干扰要求液质方法有很好的选择性,都能获得期望的灵敏度。由于环肽类化合物的三级折叠结构以及其结构中缺乏活泼的质子,也会经常防碍产生碎片离子。
结论:在SCIEX Triple Quad™7500 LC-MSMS系统- QTRAP® Ready上建立了环肽类化合物定量的方法,该方法灵敏度高。人ANP和BNP在大鼠血浆中的定量下限为0.05ng/mL,分析方法重现性、准确度、定量线性良好。在配有E Lens技术的OptiFlow Pro离子源和D Jet离子导向技术的加持下,本文的方法与之前报道方法相比,灵敏度有显著提高
7 直接检测饮用水和瓶装水中农残和PPCPs的LC-MS/MS方法
饮用水分析的限量值(prescribed consent values, PCV)极低且严格。水供应商和公用事业公司需要确保他们送去装瓶或进入供水网络的最终水产品是安全的,并且符合国家的法规要求。1,2,3水可能是一个具有挑战性的基质,尤其是在进入水处理过程之前的来自河流、湖泊或水库的水。因此,为自来水公司提供服务的实验室必须有高灵敏度的仪器,来精确的定量超出PCV限值的数据和面对各种基质的挑战。
结论:通过水中431种化合物的定量分析,证明了SCIEX TripleQuad 7500 LC-MS/MS系统- QTRAP Ready灵敏度高,在低浓度化合物(ng/L级别的痕量测定)的测定分析领域具有很大潜力;样品直接进样分析,无需复杂前处理过程,提高了工作效率;采用直接进样的方式即可使水研究实验室超越现在的灵敏度极限;SCIEXOS软件操作简单灵活。采用本文的工作流程可大大缩短从采样到出报告的时间,这将对水环境的监测和质量把控工作提供积极的影响。
可以根据客户的实际需求进行化合物的扩充,也可以应用到其他低浓度痕量物质的测定工作流程中。创新的SCIEX 7500系统可以有效降低基质效应,提高灵敏度,这必将引领水行业进入一个新的分析时代。
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