二手LCMS样品制备方法

1样品处理的好坏直接关系到整个二手LC-MS分析的成败，必须要有成熟规范的样品制备方法。

2样品预处理各步不能随意省略，如萃取、分离、去盐等。某些化合物必须进行化学衍生化以适应LC-MS要求，如磷酸酯水解。

3若MS信号实在太低，考虑更换样品前处理方法。

4浓度非常低的样品不能保存太长时间，容器吸附、分解等原因使样品浓度降低，标准品工作液现配现用。

离子化方法选择：根据样品性质确定离子化方式适合ESI(IS)的样品类型。

高极性化合物、蛋白质、肽类，低聚核苷酸等生物分f：-肢类，季铵盐等。
含杂原子的化合物：如氨基甲酸酯等适合APCI的样品类型。
弱极性冲等极性的小分子，如脂肪酸，铝苯二甲酸等-含杂原子的化合物，如氨基甲酸酶、脉等ESI不适合的化合物:极端非极性化合物如苯等。
APCI不适合的化合物：非挥发性样品， 热稳定性差的样品离子化方法选择。

一般情况下
碱性化合物宜用正离子方式
酸性化合物宜用负离子方式
不明确的化合物，优先试用正离子方式
如未知，可能正、负都要试
*有些化合物正、 负模式都出峰，选择灵敏度高的方式。

  LC条件的选择：根据化合物类型选择流动相组成，甲醇水，么腈水或甲醇-乙。
*某些化合物只有某种流动相体系才出峰。
*一股正离子方式用甲醇，负离子方式用乙腈好些其等。
*通常有机相比例高些，离子化效率高。
*梯度的设定:梯度变化太快对离子化效率影响很大，相应源参数也应该改变，所以当恒定比例流动相(即等度分离能满足分离分析耍求时，尽量不用梯度，尤其定量分析时。
*有时，流动相中加入微量的甲酸或乙酸铵等，可提高正离子化效率。

LC条件的选择:
*是否加酸不是绝对的，具体应根据LC的分离情况、样品在酸性条件下的稳定性等决定。
通常pH值低时，[M+H]+ 比率高: pH值高时，[M+Na] +、[M+K]+,或[M+NH4] +比率会比较高。
定性分析时，有时加一些NH，Li+等，可帮助确定判断母离子，对碎片较少的化合物，可以增加其质谱特征性，但会使生物大分子的质谱复杂化。
水的选择:娃哈哈纯净水比普通蒸馏水好，若在玻璃瓶中已存放时间太长，有可能变质。当本底增大，LC压力增高，应更换水相在色谱柱和MS允许情况下，LC流量适当提高，可以压缩峰宽，使峰强度提高。

LC条件的选择

溶解样品的溶剂:用与流动相相同的溶剂体系做溶剂，一般水含量较高时，蜂形好，通常含水量80-90%。

如果常用的流动相体系不能很好地溶解样品,可用少量特殊溶剂先将样品溶解后，再用流动相稀释。

当只有粗色谱柱，只能用大流量时可采用三通分流，以适应MS的流量要求选细色谱柱，如内径2mm,进样量可以小，提高相对浓度，离子化效率，灵敏度。

换长些的色谱柱，对定性分离效果好，但分析时间延长，如峰形仍不理想，可考虑另选其他型号色谱柱。

当不得不用高浓度TFA时，可在柱后添加并丙醇，缓解信号抑制问题。柱后衍生化，有时可增加离子化效率。

二手LCMS调机准备 

仪器平衡时间：有条件时尽可能长些，对分析有利。平衡时需平衡的因素有真空、温度、LC流动相比例等。
容器污染：塑料离心管很容易混入添加剂，尤其是被有机溶剂浸泡时间较长时，干扰物信号有时会超过待测物。
LC PUMP脱气，先放掉柱前部管路中液体，排净气泡，还要注意储液瓶液面高度。