曲谱瑞林,十个氨基酸组成的合成肽,是一种促性腺激素释放激素激动剂,用于治疗激素反映性癌症,比如前列腺癌和乳腺癌。用于男性时,曲谱瑞林可减少血液中睾酮的含量,从而抑制前列腺癌的生长。当用于女性时,曲谱瑞林减少雌激素的产生。许多临床和制药的应用需要检测低浓度的曲谱瑞林,由于要处理分析大量的生物样品,因此需要稳定和高通量的监测方法。
在AB SCIEX QTRAP 6500系列质谱仪上,实现了高流速条件下超高灵敏度的多肽分析,同时展示了运用这些新方法分析大量样品样本时,仪器的长久耐用性。6500系列质谱的lonDriveTM技术由于能够提升离子化效率、离子采样水平和离子传输率,拓宽检测器的动态范围,提高信噪比,加快扫描速度,因此能够实现超高的分析灵敏度。新型lonDriveTM Turbo V离子源的设计,提高了去溶剂化效率和离子产生率,即便在高流速下也能保持高水平的灵敏度。创新的双QJet离子传输部件保持设计简单和耐用性的同时增强了离子传输效率。总之,检测技术和离子传输效率的提升实现了超高灵敏度,可用于任何多肽的定量分析。
血浆中高通量多肽定量面临的主要挑战:
1、低准确度 — 无论是药物发展阶段的法规还是治疗监测均要求血浆中曲谱瑞林的检测具备高的准确度。
2、灵敏度不足 — 在复杂基质中实现pg/mL检测水平非常具有挑战性。
3、数据质量不符合标准 — 低浓度多肽分析的精密度和准确度很差,数据结果不满足生物分析标准。
lonDriveTM技术进行高通量多肽定量的主要特点:
1、lonDriveTMQJet离子导入部件 — 增加离子采样率以提高方法的有效性和耐用性。
2、lonDriveTM高能检测器 — 新的检测技术扩宽动态范围,以提高灵敏度。
3、质量范围m/z 5-2,000 — 更宽的质量范围满足多肽定量的需求。
4、lonDriveTMTurboV离子源 — 增强离子化效率和热传递率,提高灵敏度。
lonDriveTM技术进行高通量多肽定量的主要优势:
1、完美的线性 — 宽的动态线性范围确保实现复杂基质中宽多肽浓度的准确测定。
2、超灵敏的方法 — 曲谱瑞林在OTRAP6500系统上的LLOQ为5pg/mL,灵敏度比5500系列提高了8倍。
3、精确的测定 — 在标准曲线范围内,数据质量符合或高于生物分析方法验证标准。
在建立在QTRAP 6500仪器和快速色谱上的LC-MS/MS方法,用于检测大鼠和人血浆中pg/mL水平的曲谱瑞林,样品运行时间<5分钟。
所得结论,在具有lonDriveTM技术的SCIEX QTRAP 6500系统上,实现了高灵敏度和高通量的多肽定量分析。在高流速条件下,QTRAP 6500系统能够检测到血浆中LLOQ低至5pg/mL(柱上0.038 fmol多肽)的曲谱瑞林。在QTRAP 6500系统可以快速获得实验数据,其LLOQs与之前在QTRAP 5500上的结果相比,灵敏度提高了八倍。
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